Introduction to ChromaLINK Labeling Technology ChromaLINK Biotin은 UV 추적 가능한 바이오틴을 단백질과 항체에 통합합니다. ChromaLINK Biotin은 많은 새로운 특징들을 포함하도록 설계되었습니다. Figure 1에 나타낸 것처럼 분자 구조는 PEG3 linker arm (b)에 의해 바이오틴 (c)에 연결된 bis-arylhydrazone chromophore (a)를 포함합니다. 이것이 통합된 바이오틴의 직접적인 분광학적 정량을 가능하게 합니다. 확장된 PEG3 linker는 변형 후에도 바이오틴/스트렙트아비딘 친화력을 보존하고 단백질 용해도를 유지하며, succinimidyl ester 작용기 (d)는 수용성 버퍼에서 라이신을 효율적으로 변형합니다. 
Figure 1. ChromaLINK Biotin의 분자 구조 ChromaLINK Biotin를 이용한 단백질 라벨링은 통합된 바이오틴의 정량화를 위해 자주 사용되는 번거롭고 시간이 많이 소요되는 HABA assay를 수행할 필요가 없습니다. 대신, 바이오틴 통합은 두 파장에서의 간단한 분광도 측정을 통해 정량화됩니다 (A280/A354). 전형적인 라벨링 결과는 4개의 샘플의 스펙트럼 오버레이 스캔으로 표시된 Figure 2에 설명되어 있습니다. 그림과 같이, Bovine IgG (100ul @ 5mg/ml)를 ChromaLINK Biotin을 사용하여 0, 5, 10, 15 몰 당량 (mole equivalent)에 라벨링 하였습니다. 스펙트럼 분석은 바이오틴 결합을 시각화하고 확인하며 정량화하는 것이 얼마나 쉬운지를 보여줍니다. 
Figure 2. ChromaLINK Biotin을 이용해 바이오티닐화한 bovine IgG의 중첩 스펙트럼. 다양한 바이오틴 대 단백질 몰 당량 (5X, 10X, 15X)이 사용되었다. 354nm의 UV 시그널이 바이오틴의 통합을 나타낸다. 모든 스펙트럼은 Molecular Dynamics SpectraMax PlusTM UV-VIS plate reader (220-420 nm)로 스캔했다. | 
