A. Product Description ChromaLINK Biotin Protein Labeling Kit에는 라이신 함유 단백질의 추적 가능한 바이오티닐화에 필요한 모든 시약이 들어 있습니다. 이 키트는 약 2시간 안에 최대 5개의 단백질을 바이오티닐화 하고 정제하는데 충분한 재료를 공급하고 합니다. 각 라벨링 반응의 스케일은 사용자에 의해 선택되며 최소 25 μg에서 최대 1 mg까지 확장될 수 있습니다. 
Figure 1. ChromaLINK Biotin (C38H50N8O10S; MW 810.92)의 구조 ChromaLINK Biotin Protein Labeling Kit의 라벨링 프로세스는 ChromaLink Biotin (Figure 1)이라는 특허 받은 UV-traceable linker를 기반으로 합니다. 이 과정은 인산염 완충 시스템에서 단백질 라이신 잔기를 효율적으로 변형하는 방향족 N-hydroxy-succinimidyl ester 작용기 (a)가 함유된 첨단 단백질 바이오티닐화 시약을 기반으로 합니다. Linker는 내장된 bis-aryl hydrazone structure 구조 (b)를 가지고 있으며, 이 구조가 UV-traceable chromophore를 형성합니다. 이 독특한 chromophore의 추적 가능한 성질은 단백질에 부착된 바이오틴 (c)의 비파괴 정량화를 가능하게 합니다. 이 세 가지 요소는 long-chain PEG3 spacer (d)를 통해 서로 연결되어 스트렙트아비딘/바이오틴 친화력을 보존하면서 동시에 항체 용해도를 유지합니다. B. Features and Benefits
ChromaLINK Biotin Protein Labeling Kit는 최소 25 μg에서 최대 1 mg의 단백질을 정량적으로 바이오티닐화하는데 있어 가장 쉬운 솔루션을 제공합니다. 20–200 kDa의 분자량의 단백질은 ChromaLink Biotin을 사용하여 쉽게 바이오티닐화됩니다. 프로토콜은 단백질의 추적 가능한 바이오티닐화를 수행하기 쉽게 설계되었습니다. ChromaLink Biotin 사용은 바이오틴 통합 정도를 결정하는 데 사용되던 기존의 HABA 또는 FluoroReporter™ (trademark of Invitrogen Corp.) assay와 같이 시간 소모적이고 번거로우며 간접적인 방법을 수행할 필요가 없다는 것을 의미합니다. 라벨링 후 바이오틴 molar substitution ratio는 간단한 UV-spectrophotometric scan (220–420 nm)이나 2파장 (A280/A354)에서 single point로 직접 측정합니다. 또는 단백질 분석 (예: BCA 또는 Bradford)과 함께 단일 파장 (A354)을 사용하여 molar substitution ratio (MSR) 또는 단백질 분자 당 바이오틴 수를 정량화할 수 있습니다.
C. Process Summary 1. 샘플 준비 (10분)
2. 1차 버퍼 교환 (10분)
3. 단백질 정량 분석 (BCA assay) (30분)
4. 바이오티닐화 (120분)
5. 2차 버퍼 교환 (10분)
6. UV 분석 및 계산 (20분) D. Labeling Process Diagram ChromaLINK Biotin Protein Labeling Kit의 라벨링 프로세스는 Figure 2와 같습니다. 
Figure 2. ChromaLink Biotin 단백질 라벨링 프로세스. | 
